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发布于2025-10-22 阅读(0)
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2、 利用蛋白酶K与SDS破坏细胞结构并降解蛋白质,随后通过酚和酚-氯仿进行抽提,经高速离心后收集上清,可得到大小在100至150kb范围内的DNA片段。
3、 在细胞破碎后,使用高浓度甲酰胺解除蛋白质与DNA的结合,再经过透析步骤,能够获得长度约200kb的DNA。
4、 以盐酸胍裂解细胞,将裂解液置于乙醇上方形成界面,用带钩或U型玻璃棒轻缓搅动,DNA即缠绕于玻棒上析出,所获DNA片段大小约为80kb。
5、 异丙醇沉淀法操作与方法一相近,仅将乙醇替换为两倍体积的异丙醇,可有效除去溶于异丙醇的小分子RNA杂质。
6、 使用Triton X-100A或NP40等表面活性剂裂解细胞,接着采用蛋白酶K或酚类方法去除蛋白成分,最终通过乙醇沉淀或透析实现快速DNA制备。
7、 将样本在96℃到100℃条件下加热5分钟,离心后取上清,可直接作为PCR反应的模板使用。
8、 碱变性快速提取法:先以NaOH处理20分钟,再用HCl中和,离心后所得上清中含有少量DNA。

9、 补充资料:
10、 DNA提取应遵守基本要求
11、 保持核酸一级结构的完整性,避免损伤。
12、 提取的核酸样品中不应含有抑制酶活性的有机溶剂或过量金属离子。
13、 尽可能降低蛋白质、多糖、脂类等大分子杂质的污染。
14、 其他核酸成分如RNA也需尽量去除。
15、 上述DNA提取方法信息来源于百度百科相关条目内容。
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